Kromatografi kolòn konvansyonèl yo
2. Kolòn Chromatografik (kalite wotasyon)
3. Kolòn Chromatografik (Manyèl)
*** Lis pri pou antye pi wo a, mande nou jwenn
Dekri teren
Karakteristik teknik
Kromatografi kolòn konvansyonèl yoitilize diferans lan nan rapò distribisyon nan sibstans ki sou diferan ant faz la estasyonè ak faz mobil lan, oswa kapasite yo retansyon diferan nan faz fiks relatif nan sibstans ki sou diferan, reyalize separasyon sibstans. Lè melanj lan ap koule nan kolòn nan kwomatografik ak faz mobil lan, li pral kominike avèk faz nan estasyonè nan kolòn nan (tankou yap divòse, adsorption, elatriye). Akòz diferans ki genyen nan pwopriyete fizik ak chimik ak estrikti nan chak eleman nan melanj lan, grandè a ak fòs nan entèraksyon yo ak faz nan estasyonè tou varye. Anba menm fòs la kondwi, tan an retansyon nan chak eleman nan faz nan estasyonè se diferan, se konsa ke eleman yo nan melanj lan koule soti nan kolòn nan nan yon lòd sèten, reyisi separasyon.
Paramèt
Deteksyon rezidi pestisid
 |
 |
 |
 |
Nou souvan di saKromatografi kolòn konvansyonèl yose aktyèlman kolòn separasyon kromatografi, ke yo rele tou kolòn kwomatografi. Li te premye envante ak itilize pa syantis Ris nan 1903. Li kraze yon solisyon nan pigman plant nan kalsyòm poud carbonate epi li te jwenn diferan Gwoup Mizik koulè sou poud lan kalsyòm carbonate soti nan tèt a anba. Pa separe ak èkstraksyon Gwoup Mizik koulè diferan, relativman pi klowofil, lutein, elatriye yo te jwenn.
Apre yon santèn ane nan devlopman, te metòd sa a vin relativman matirite, ak faz la estasyonè te tou evolye nan yon sèl kalsyòm poud carbonate nan alumina (ki ka divize an asid, net, alkalin), silica jèl, aktive kabòn, elatriye nan mitan yo, silica jèl se pi souvan itilize nan laboratwa pi gwo, jeneralman divize an silica jèl ak global pi gwo nan laboratwa pi gwo, jeneralman divize an silica jèl ak global pi gwo nan laboratwa pi gwo, jeneralman divize an silica jèl ak pi gwo nan laboratwa yo, jeneralman gèl la, jeneralman gels pi gwo, jeneralman gels yo, se yon jèl silica ki pi souvan itilize nan faz ki pi souvan itilize nan pi gwo faz, jeneralman global, jeneralman gelil yo, se sa ki pi gwo a, elatriye.
Faz nan estasyonè (jèl silica) jeneralman bezwen yo dwe pirifye ak aktive, ak gwosè a patikil yo ta dwe inifòm. Nan teyori, pi piti a gwosè a patikil ak pi gwo a zòn nan sifas pou chak inite mas, pi wo a kapasite a adsorption ak pi bon an efè a separasyon.
Sepandan, nan itilizasyon pratik, lè patikil yo faz fiks yo twò piti, gen souvan de sitiyasyon: youn se yo ke yo se pi lejè nan pwa ak fasil flote nan lè a (jèl silica pa ka degrade pa kò imen an, ak sibtilite a, plis toksik la li ye); Dezyèmman, ti patikil kapab tou mennen nan ti twou vid ki genyen ant patikil, sa ki lakòz yon ralanti to koule sòlvan ak konsomasyon tan; Pran silikone kòm yon egzanp, pi gwo gwosè a itilize nan silikone se kounye a 200-300 may.
An tèm de kolòn pase metòd, nan adisyon a ekipman an analiz otomatik tankou pi devan preparasyon sikilasyon, efikas preparasyon faz likid, ak kolòn pase machin mansyone pi bonè, manyèl pase kolòn se sitou divize an twa kalite: kolòn presyon atmosferik pase, depresurization kolòn pase, ak pase kolòn presyon.
Pami yo, depresurization a nan kolòn nan rezilta yo nan efikasite adsorption pòv akòz pousantaj la koule vit nan elue a, ki mennen nan pèt la nan pi fò nan kantite plato ak efikasite separasyon pòv yo. Li apwopriye pou separe echantiyon yo ak plak relativman louvri TLC, espesyalman pou echantiyon yo ak yon sèl gwo malpwòpte polè nan pwodwi a; Pifò nan tan li yo te pase sou pre-tretman an nan konpoze, retire kèk enpurte anvan pirifye atansyon. Li ta dwe te note ke evaporasyon sòlvan ki te koze pa presyon negatif pandan itilize ka mennen nan kondansasyon an nan yon gwo kantite ti gout dlo sou sifas la deyò nan kolòn nan. Konpoze dlo sansib pa ta dwe fasilman eseye.
Pase kolòn presyon atmosferik se metòd separasyon ki pi efikas nan mitan twa a, men paske sòlvan an souvan deplase twò dousman, menm pi bon efè separasyon an kapab afekte efikasite. Se poutèt sa, se presyon anjeneral aplike nan moman sa a, ki te rele presyon kolòn pase; Men, presyon an pa ta dwe twò wo. Anjeneral, yo itilize yon boul chèn doub pou operasyon manyèl, epi yo itilize yon ponp pwason pou operasyon otomatik. Tou de ka modifye jan yo montre nan foto a.
Pwosesis konvansyonèl kolòn travèse:
Travay preparasyon yo ta dwe fè byen:
Lè w ap chwazi yon kolòn, obsève si gen yon tablo sable. Pou kolòn san sable ankadreman, sonje ranpli anba a ak kèk koton. Koton an pa ta dwe twò epè oswa twò mens, osi lontan ke li ka bloke silikone a soti nan vini sou. (Blogger a dirèkteman demoute yon hanger rad ak itilize li nan insert koton nan priz la sou ploge an)
Prepare minimòm polarite eluent la, UV lanp (rekòmande pou pèsonèl laboratwa, pòtatif, pare yo pran yon foto a nenpòt ki lè), ekipman presyon, ak etajè tib tès jan sa nesesè!
Chwazi yon kolòn apwopriye, ajoute jèl silicone, tranpe jèl la silicone, ak plati li
Seleksyon an nankromatografi kolòn konvansyonèl yotrè enpòtan, ak gwosè yo ta dwe kalkile ki baze sou kantite lajan an nan pwodwi, ki ka jeneralman dwe divize an:
Yon kèk miligram nan kolòn (chwa final la pou sentèz total);
Yon kolòn nan plizyè dizèn de miligram (metodolojik ekspansyon substrate);
500 miligram a 1 gram kolòn (lè l sèvi avèk metodoloji kòm materyèl anvan tout koreksyon);
Poto alantou 5g ak pi gwo balans.
Rapò ki pi komen nan dyamèt kolòn nan wotè nan laboratwa a se jeneralman ant 1: 2.5 ak 1:15. Kantite lajan an nan jèl silica itilize kòm yon faz estasyonè pandan loading echantiyon se sou 20 a 40 fwa sa yo ki an echantiyon an. Estanda a pou chwazi kolòn yo ta dwe baze sou sitiyasyon an TLC plak k ap grenpe nan echantiyon ou an. Si gen anpil enpurte nan pi pre, eseye chwazi yon kolòn pi gwo otank posib, pou ke echantiyon ou ka kouvri ak yon ti kouch mens (rekòmande epesè anba a 5mm). Si enpurte yo byen lwen, epesè sa a ka natirèlman ogmante, men li pa rekòmande ke epesè nan echantiyon ou depase 2cm, sof si se pwodwi a tou senpleman lave.
Anpil moun fè yon erè nan panse ke ajoute plis silicone, menm si li se pi epè sou echantiyon mwen an, li ka li dwe separe byen? Repons sa a negatif!
Rezon ki fè la se ke moun sa yo pa janm te panse ke echantiyon ki anba yo ak pi wo a pa te kouri sou menm liy lan, pou yo te kapab sèlman jwenn kèk moun pi, pi fò nan yo ki te janbe lòt, nou pa mansyone moun move, gaspiye tan ak Solvang!
Sa a tou poukisa echantiyon an mande pou eklèsi!
Apre chwazi kolòn nan, ajoute silicone ka fè nan yon antonwa manje. An menm tan an, asire w ke ou mete yon mask ak opere nan yon kapo vapè. Rezon ki fè la pou sa a pa pral elabore pa Blogger a (silikoz).
Kòm pou enfiltrasyon nan jèl silica, pwosesis la rekòmande se: premye, mete kolòn nan jèl silica ak jèl la silica enstale vètikal, aplati sifas la nan jèl la silica ak men ou, konekte anba a nan kolòn nan jèl silica nan yon ponp dlo, ponp soti jèl la silica, ak Lè sa a, Pour nan pi piti polè a nan pi wo a. Lè elue a se sou yo fuit soti, fèmen valv la fèmen-yo anpeche sòlvan yo te ponpe nan ponp lan dlo.
Lè sa a, anba presyon, jèl la silicone ka egzakteman menm jan tranpe pa flòch sèt oswa uit volim kolòn ak kantite lajan ki pi piti a nan devlope ajan.
Egzanp pi wo a
Pran echantiyon an divize an echantiyonaj mouye ak echantiyon sèk.
(1) Mouye echantiyon.
Metòd la rekòmande se sèvi ak yon pipèt ak yon tip kawotchou yo souse echantiyon an, fèmen nan seksyon an tèt nan jèl la silicone, tou dousman epi respire degoute echantiyon an jiskaske li kouvri yon kouch, Lè sa a, sispann ajoute echantiyon an epi aplike kèk presyon nan plonje sibstans nan lwil nan kouch nan jèl silikone; Plonje sibstans ki sou lwil nan kouch silikone a epi repete pwosesis sa a plizyè fwa jiskaske tout echantiyon yo chaje!
Gen kèk nouvo elèv ki ka kirye poukisa operasyon sa a te pote soti olye pou yo kouch lwil la pwosesis mouye tankou sibstans tout nan yon fwa?
An reyalite, operasyon sa a ka diminye wotè efikas kouch echantiyon an. Nan pwen sa a, te kolòn kromatografi deja kòmanse, ak echantiyon yo ki vin apre yo tankou Solvang pouse echantiyon yo anvan yo adsorb ak desorb nan jèl silica.
(2) Kòm pou echantiyon sèk.
Sòf si li nesesè, li pa rekòmande. Echantiyon solid yo plis rekòmande yo dwe bat oswa kristalize. "Metòd ki malonèt, etil acetate vs dlo, osilasyon ultrasons te ede kristalize nan lwil oliv bouyi segondè" ak "pataje yon metòd rkristalizasyon laboratwa" yo rekòmande.
Echantiyon sèk jeneralman pote de pwoblèm; Sou yon bò, pandan pwosesis la echantiyon melanje, posibilite pou reyaksyon ant echantiyon an ak silica jèl ogmante akòz bezwen nan ogmante tanperati a pou evaporasyon Rotary; Nan lòt men an, loading sèk vle di ke adsorban yo pral prezante nan kouch nan echantiyon, ogmante wotè nan kouch nan echantiyon oswa gwosè a nan kolòn nan, ki egzije plis tan ak plis sòlvan.
Si pa gen okenn lòt chwa, tou senpleman vide poud la adsorbed tou dousman nan kolòn nan pou loading, ak kèk kondisyon ki sanble ak metòd mouye.
Ajoute silfat sodyòm anidrid oswa sab kwats
Yo nan lòd pou fè pou evite afekte kouch nan echantiyon pandan adisyon nan eluan, sa ki lakòz inegalite, deformation, ak ki afekte efikasite separasyon, se yon kouch nan silfat sodyòm anidrid oswa sab kwatz jeneralman mete sou tèt kouch nan echantiyon.
Enjenyè nou yo pèsonèlman pito mete anidrid sodyòm silfat paske li tou te gen yon fonksyon siye epi li se zanmitay nan Solvang tankou dichloromethane, ki se tendans volatilizasyon, absòpsyon chalè, ak kondansasyon!
Gradyan elution, pran echantiyon ak koleksyon
Apre loading, premye rense kolòn nan ak yon ti sòlvan polè (yon sòlvan ki pa pral pèmèt pwodwi a pase nan) pou 2-3 volim kolòn (yon volim kolòn defini kòm volim nan faz mobil la ap koule tankou dlo nan ak soti) asire inifòmite, ak Lè sa a, chwazi yon pwopòsyon pou elution.
Ki jan yo chwazi eluent la ki pase nan kolòn nan?
Rapò a nan eluent se rapò a lè pwodwi ou rive nan yon valè RF nan sou 0. 2 sou plak la TLC
Sa a se eksperyans nan lave kolòn ke mwen te li anpil liv ak pataje, ak pwosesis aktyèl la se tou trè menm jan an. Pèsonèlman, mwen pito diminye gradyan an pa de fwa.
Pou egzanp, si sòlvan an pou TLC plak k ap grenpe se PE/EA =2: 1, Blogger a gen plis chans yo kòmanse gradyan elution soti nan PE/EA =4: 1 epi fini nan PE/EA =2: 1, jeneralman ki kapab lakòz nan pi bon rezilta yo.
Genyen tou teknik lè kolekte eluent. Ou ka premye chwazi yon tib tès pi gwo yo resevwa li, epi lè TLC ap apwoche pwen an sib, chanje nan yon tib tès ki pi piti. Sa ka diminye posibilite pou resevwa plis epi evite enpurte.
Si ou rankontre sitiyasyon kote pwen malpwòpte ak pwen pwodwi yo fèmen ansanm, espesyalman sa yo ki gen fluoresans fèb, sonje pa aplike presyon. Olye de sa, chwazi yo pase kolòn nan anba presyon nòmal, epi chanje tib la chak fwa mwatye oswa mwens tib yo konekte, ki ka tou ogmante pwobabilite pou pirifye.
Sonje pa okipe gwo poto a nan yon fason apwopriye!
Anpil moun gen yon abitid nan asepte ke te kolòn nan te pase ak seche lè pa gen okenn pwodwi nan youn oswa de tib apre TLC nan etap nan pita.
Mwen sèlman reyalize ke sede a te twò ba lè mwen kalkile li, oswa lè mwen te ale nan fè yon spectre, mwen te jwenn ke spectre a te kòrèk ak rate pwen an mal. Mwen regrete li pwofondman.
Se konsa, li rekòmande ke ou pa prese nan pwosesis kolòn nan apre yo fin ranpli pwen an vle. Olye de sa, fè nikleyè mayetik sonorite matche ak sede a anvan yo trete.
Si ou se okipe oswa nan yon prese pirifye lòt konpoze ak sa akromatografi kolòn konvansyonèl yo, li rekòmande pou rense l avèk yon gwo polarite Benign melanje sòlvan epi kite pati sa a nan elu a separeman pou rezilta idantifikasyon yo.
Baj popilè: Kromatografi kolòn konvansyonèl, Lachin Konvansyonèl Kolòn Kromatografi manifaktirè, Swèd, faktori
Pwochen
Kromatografi kolòn klasikVoye rechèch
